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实验室器皿的洗涤与消毒
2015/6/23 阅读次数:[2829]
    一、玻璃器皿的洗涤
   (一)、浸泡
   新瓶使用前应先用自来水简单刷洗,然后用稀盐酸溶液(5%)浸泡过夜;培养后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中;
   注意:让水能完全进入瓶皿中,不应留有气泡。
   (二)、刷洗
   浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂洗涤(宜选用软毛刷和优质的洗涤剂,如高级洗衣粉或洗洁精),绝对不能使用含沙粒的去污粉!洗刷时特别注意洗刷瓶角部位。
   (三)、浸泡
   器皿要充满清洁液,勿留气泡。浸泡时间不应少于6小时;一般应浸泡过夜。
   清洗液配方:
   【强液】 重铬酸钾 63g
   浓硫酸 1000ml
   蒸馏水 200L
   【次强液】 重铬酸钾 120g
   浓硫酸 200ml
   蒸馏水 1000ml
   【弱液】 重铬酸钾 100g
   浓硫酸 100ml
   蒸馏水 100ml
   矽酸钠洗液;
   使用比较安全,可以代替清洗液,但价格较贵。
   先配制成100Χ贮存液:矽酸钾80g,偏磷酸钠9g,加热溶解在1000ml蒸馏水中。使用时,用蒸馏水100倍稀释。
   (四)、冲洗
   刷洗和浸酸后都必须用水充分冲洗,使之不留任何残迹。冲洗宜用洗涤装置,以保证冲洗效果,如用手工操作,每瓶都得用水灌满,倒掉,重复十次以上,最后再用蒸馏水漂洗2~3次,凉干备用。
   二、胶塞的清洗
   新购置的胶塞先用自来水冲洗干净后,再做常规处理。
   常规洗涤方法:
   浸泡—2%NaOH煮沸(10~20分钟)—自来水冲洗—1%稀盐酸浸泡(30分钟)—自来水冲洗—蒸馏水清洗(2~3次)—凉干备用
   三、塑料器皿的清洗
   目前我国培养使用的塑料器皿主要是从国外购置的,是一种无毒并已经消毒过灭菌密封包装的商品。用时,只要打开包装即可,是一次使用性物品。必要时,用后经无菌处理后 ,尚可反复使用2~3次,但不宜过多。再用时仍然需要清洗和灭菌处理。塑料器皿质地软,不宜用毛刷刷洗,造成清洗困难。为此使用中一是防止划痕,二是用后要立即浸入水中,严防附着物干结;如残留有附着物,可用脱脂棉清拭掉,用流水冲洗干净,凉干、再用2%NaOH液浸泡过夜,用自来水充分冲洗,然后 用5%盐酸溶液浸泡30分钟,最后用自来水冲洗和蒸馏水漂洗干净,凉干后备用。
   消毒。
   四、紫外线消毒
   紫外线直接照射法很方便,效果好,是目前各实验室常用的消毒法。
   【适用范围】空气、操作台表面和一些不能使用其它方法进行消毒的培养器皿(如塑料培养皿、培养板等)
   【要求】(1)培养室的紫外线灯应距地面2.5米,使每平方厘米有0.06微瓦能量的照射,才能发生有效的消毒作用。(2)由于各种细菌对紫外线的敏感性不同,所用照射时间和剂量也不同。
   【缺点】(1)产生臭氧,污染空气,对身体有害;(2)射线照射不到的部位起不到消毒作用,故消毒时,物品不宜相互遮挡。
   【注意】 有人习惯于边照射边进行实验操作,这样不好,一是紫外线对细胞、试剂和培养液都有不良影响,二是对人体皮肤也有伤害。
   五、湿热消毒
   湿热消毒即高压蒸汽消毒,是最有效的一种方法。
   【适用范围】布类、胶塞、金属器械、玻璃器皿及某些培养用液。
   【要求】
   培养用液、橡胶制品 10磅10分钟
   布类、玻璃制品、金属器械等 15磅20分钟
   六、滤过消毒
   【适用范围】 大多数培养用液,如人工合成培养液、血清、酶溶液等(这些在高温下会发生变性,失去其功能,必须采用滤过法除菌。
   【常用滤器】 Zeiss滤器、微孔滤膜滤器及各种不同规格的一次性滤器。常用孔径0.22um滤膜过滤一般用液即可。
   【注意】
   (1)滤膜用后丢弃,滤器清洗也比较方便,先用毛刷蘸洗涤剂刷洗干净,用自来水冲洗后,再用蒸馏水冲洗,凉干即可;
   (2)用前再装上一张新的滤膜;
   (3)消毒时旋钮不要扭太紧,凡与空气接触部位都用纸包装好,以保证消毒时的效果;
   (4)消毒后,在无菌环境中立即将旋钮扭紧;
   (5)滤过少量液体时,用一种能安装在注射器上的小滤器,使用相同的滤膜,滤过时把滤过物装入注射器针管内,压出过滤物注入无菌容器中即。
 
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